Experiencia miniPCR: MiniPCR Genotipo a Fenotipo

La Experiencia miniPCR: MiniPCR Genotipo a Fenotipo examina cómo las variaciones genéticas afectan nuestra capacidad para percibir el mundo que nos rodea. Utiliza técnicas moleculares para determinar si posees alelos de “taster” (catadores) o “non-taster” (no catadores).

El gen del receptor del gusto TAS2R38 determina la capacidad de percibir el sabor amargo del compuesto feniltiocarbamida (PTC) y de otros alimentos amargos, como el brócoli. Los estudiantes analizan su propio gen TAS2R38 y correlacionan su genotipo con su percepción del sabor, un ejemplo directo de cómo una variación mínima del ADN, llamada SNP, se traduce en un rasgo observable.

En el gel, un catador muestra dos bandas de 150 y 100 pb, porque el sitio de restricción está presente; un no catador muestra una sola banda de 250 pb, y un catador intermedio muestra las tres bandas. Con los datos del curso se pueden trabajar extensiones como el equilibrio de Hardy-Weinberg y la prueba de chi cuadrado. El fabricante ofrece la guía en PDF y una versión interactiva en su plataforma miniPCR Digital, ambas en inglés.

Relación con el currículum

Se relaciona con el OA 3 (dogma central de la biología molecular y flujo de la información genética del ADN al ARN y a las proteínas) del electivo Biología Celular y Molecular (3° o 4° medio): una variación en un solo gen cambia la capacidad de percibir el sabor amargo. Es una relación temática: la actividad no forma parte del programa de estudio.

Técnicas: Micropipeteo, extracción de ADN, PCR, digestión con restricciones, electroforesis en gel.

Temática: Herencia genética, genotipo a fenotipo, biotecnología.

Nivel: Educación media a universitaria.

Tiempo requerido: Puede completarse en dos períodos de clase de 45 minutos o un período de clase de 120 minutos

¿Qué incluye?

Reactivos para 32 estudiantes:

• X-Tract™ DNA Extraction Buffer (2 viales).
• 2X EZ PCR Master Mix, Load-Ready™.
• PTC Lab Primer Mix, concentrado 2X.
• Enzima de restricción Fnu4HI
• Fast DNA Ladder 2, Load Ready™
• Agua libre de nucleasas

Almacenar

Si se mantiene en el congelador, los reactivos pueden ser almacenados durante 12 meses después de su recepción. Si se mantienen en el refrigerador, los reactivos pueden ser almacenados durante 1 mes después de su recepción.

Requiere

Equipo requerido:

• Micropipetas de volumen variable de 2-20 μl y puntas
• Termociclador miniPCR® mini8X o mini16X
• Sistema de electroforesis y visualización blueGel™, GELATO™ o Bandit Duo™
• Palillos de madera de extremo plano
• Microcentrífuga (opcional)
• Papel PTC (opcional)

Reactivos necesarios para la electroforesis en gel:

• Agarosa en tabletas: Agarose Tabs™, o SeeGreen™ todo en uno (que ya incluye tampón y tinción)
• Tampón TBE en polvo
• Tinción de ADN SeeGreen™ o GelGreen®
• Tubos de 1.7 ml para distribuir muestras a los grupos de estudiantes
• Tubos PCR de 0.2 ml

Usos previstos

• Realización de experiencias guiadas de biología molecular con equipo miniPCR
• Enseñanza práctica de conceptos de genética y biotecnología

*Imagen referencial